三名少女各怀不同的目的，糊里糊涂的成功考进警校，与其他来自不同背景的女同学一同受训。每日面对刻苦操练，上山下海，这班平时享乐惯了的少女们被弄至死去活来，唯独琳因为心中有着为姐报仇之决心，所以一直面不改容，成绩最为突出，而教官沈靖(梁铮饰)对她也另眼相看，知道她内心必定有不可告人的秘密，于是主动对她友善接触，发展出一段单向的姐妹情来……
而嘉美也不忘记者身份，当她发现琳与女警官经常见面后，便开始制造机会，偷拍一些看来两人状甚亲密的同性恋假象照片，然后送交编辑……训练中经常分成小组进行，每次荧营、嘉美和琳都编成一组，琳独断独行，荧营则刁蛮任性，所以两人时常发生口角。在一次实弹演习中，娇弱的荧营与“酷娃”琳编成一组，互相责怪埋怨，不慎手枪走火，荧营负伤，琳因此被革离校……
后来荧营得知琳的过去，逐感到内疚，靖也已查出了琳的背景，认为琳甚有潜质，不应放弃，所以她私下向校方求情，让她回校，并答应她一定帮她将杀姐仇人绳之于法……琳开始觉得这个世界并非她心中所想的无情，令她的人生观和待人处世态度有所改变……回校后，荧营也主动向她道歉，二人遂冰释前嫌……
正当一切似乎都顺利地上了轨道的时候，某日在山头训练时，众未来师姐却遇上几名打劫完正在躲藏的匪徒，于是一场激战随即爆发……
作为《新扎师妹》姊妹篇的《新扎师姐》，渲染现代女警生涯，充满紧张谐趣的生活情调，被这三大艳星声色犬马一台戏，倒也演绎得飒爽风流，英姿招展。在片中，酷酷的麦家琪为姐报仇，冷辣寡情，苦练硬功；灿灿的张文慈为老板卖命，不惜趴在地板门缝中偷拍、女浴室窥拍；娇娇的吴文忻为博男友欢心，褪却脂粉一身戎装，一起加入刑警行列，她们在威严而又颇具人格魅力的女警官梁铮的调教下，尽显香港女警风流。
